คลังผลงานวิจัย กรมวิชาการเกษตร

รายงานผลงานวิจัยและพัฒนา

ศักยภาพของจุลินทรีย์ผลิตเอ็นไซม์ Cellulase และ Chitinase ที่แยกได้จากพื้นที่ได้รับผลกระทบจากการเปลี่ยนแปลงสภาพภูมิอากาศบริเวณลุ่มน้ำปาย

คำหลัก : เซลลูเลส ไคติเนส รีคอมบิแนนท์เอนไซม์ จุลินทรีย์

ผู้วิจัย : ภรณี สว่างศรี

ผู้ร่วมวิจัย : รุ่งนภา พิทักษ์ตันสกุล, สุภาวดี ง้อเหรียญ และบุญเรือนรัตน์ เรืองวิเศษ

หน่วยงาน : สำนักวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีชีวภาพ

ปี: 2562

ประเภทผลงาน: ผลงานวิจัยเรื่องเต็ม

จำนวนผู้อ่าน: 26 ครั้ง

บทคัดย่อ (Abstract)

          การคัดเลือกจุลินทรีย์ผลิตเอนไซม์เซลลูเลส และไคติเนส จากดินบริเวณลุ่มน้ำปาย บนอาหารสูตรคัดเลือกที่มีเซลลูโลส และไคตินเป็นองค์ประกอบ ตรวจวัดกิจกรรมของเอนไซม์ การเกิดวงใสรอบโคโลนีและการวิเคราะห์ปริมาณน้ำตาลรีดิวซ์สามารถคัดเลือกได้เชื้อ Bacillus velezensis ไอโซเลท 2CMC-1.1 ซึ่งมีประสิทธิภาพในการผลิตเอนไซม์เซลลูเลสได้ดี นำมาทำการโคลนยีน cellulase สามารถเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอในส่วนของยีน cellulase ที่มีขนาดประมาณ 1,500 bp เมื่อนำไปวิเคราะห์ลำดับนิวคลิโอไทด์แล้วเปรียบเทียบกับฐานข้อมูล NCBI พบว่า มีความคล้ายคลึงกับลำดับนิวคลีโอไทด์ส่วนของยีน endoglucanase gene ของเชื้อ Bacillus velezensis (Accession no. KY427020.1) ที่ identity 99 เปอร์เซ็นต์ ทำการแปรรหัสเป็นลำดับของกรดอะมิโน พบว่า มีความคล้ายคลึงกับอะมิโนแอซิดของยีน cellulase family glycosylhydrolase (Bacillus) (Accession No. WP_025851060.1) ที่ identity 99 เปอร์เซ็นต์ เมื่อทดสอบการแสดงออกในระดับโปรตีนพบว่า รีคอมบิแนนท์เอนไซม์ cellulase ที่ได้มีขนาดประมาณ 55 กิโลดาลตัน การโคลนยีนไคติเนสจากเชื้อ Paenibacillus xylanilyticus ไอโซเลท 1Ch 2.4 ซึ่งมีขนาดประมาณ 2,103 bp เมื่อนำไปวิเคราะห์ลำดับนิวคลิโอไทด์แล้วเปรียบเทียบกับฐานข้อมูล NCBI พบว่า มีความคล้ายคลึงกับลำดับนิวคลีโอไทด์ส่วนของยีน chitinase type II gene ของเชื้อ Paenibacillus xylanilyticus (Accession no. MN597082.1) ที่ identity 98 เปอร์เซ็นต์ สามารถแปรรหัสเป็นลำดับของกรดอะมิโน พบว่ามีความคล้ายคลึงกับอะมิโนแอซิดของยีน chitinase (Paenibacillus sp.) (Accession No. WP_095290735.1) ที่ identity 98 เปอร์เซ็นต์ เมื่อทดสอบการแสดงออกในระดับโปรตีน พบว่ารีคอมบิแนนท์เอนไซม์ chitinase ที่ได้มีขนาดประมาณ 74 กิโลดาลตัน

URL Reference :

(ดาวน์โหลด: 10 ครั้ง)

ปรับปรุงข้อมูลเมื่อวันที่ 18-03-2568

แจ้งไฟล์หาย