คลังผลงานวิจัย กรมวิชาการเกษตร

รายงานผลงานวิจัยและพัฒนา

การตรวจวิเคราะห์ข้าวโพดดัดแปรพันธุกรรม Mon810 และ NK603 ด้วยเทคนิค Multiplex Real-time PCR

คำหลัก : ข้าวโพดดัดแปรพันธุกรรม เทคนิค multiplex real-time PCR Mon810 NK603 การทดสอบความใช้ได้

ผู้วิจัย : ปิยนุช ศรชัย

ผู้ร่วมวิจัย : ขนิษฐา วงศ์วัฒนารัตน์, ฐิติรัตน์ อัศวมงคลศิริ และธีระ ชูแก้ว

หน่วยงาน : สำนักวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีชีวภาพ และศูนย์วิจัยปาล์มน้ำมันสุราษฎร์ธานี

ปี: 2562

ประเภทผลงาน: ผลงานวิจัยเรื่องเต็ม

จำนวนผู้อ่าน: 19 ครั้ง

บทคัดย่อ (Abstract)

          ในปัจจุบันนี้พืชดัดแปรพันธุกรรมได้รับการยอมรับในหลายประเทศ ข้าวโพดดัดแปรพันธุกรรมได้รับการอนุญาตให้มีการขายเชิงพาณิชย์มากที่สุด โดยข้าวโพดทนทานสารกำจัดวัชพืช (NK603 event) และต้านทานแมลง (MON810 event) มีการอนุญาตใช้มากสุด แต่สำหรับบางประเทศการนำเข้าและส่งออกสินค้าเกษตรมีความจำเป็นต้องทำการตรวจวิเคราะห์รายละเอียดของยีนหรือระบุสายพันธุ์ของพืชดัดแปรพันธุกรรมนั้นๆ ก่อน ซึ่งเป็นที่มาของการศึกษาการพัฒนาและทดสอบความใช้ได้วิธีการตรวจวิเคราะห์ข้าวโพดดัดแปรพันธุกรรมสายพันธุ์ Mon810 และ NK603 ด้วยเทคนิค Multiplex Real-time PCR โดยการตรวจสอบความจำเพาะและความเข้มข้นสุดท้ายของไพรเมอร์และโพรบ Event Specific Mon810 NK603 และยีน HMG แบบ Multiplex ผลการทดลองพบว่า ไพรเมอร์และโพรบมีความจำเพาะสำหรับการตรวจข้าวโพดดัดแปรพันธุกรรมสายพันธุ์ Mon810 และ NK603 คิดเป็น 100 เปอร์เซ็นต์ ส่วนความเข้มข้นสุดท้ายของไพรเมอร์ Mon810 NK603 และ HMG ที่เหมาะสมในการทำปฏิกิริยา Multiplex Real-time PCR คือ 0.15 0.3 และ 0.05 ไมโครโมลาร์ ตามลำดับ และความเข้มข้นสุดท้ายของโพรบ Mon810 NK603 และ HMG ที่เหมาะสมในการทำปฏิกิริยา คือ 0.05 0.15 และ 0.025 ไมโครโมลาร์ ตามลำดับ เมื่อทดสอบความใช้ได้ของวิธีตรวจจำแนกยีน Event Specific Mon810 และ NK603 ร่วมกับยีนอ้างอิงพืชพร้อมกันในปฏิกิริยาเดียวด้วยเทคนิค Multiplex Real-time PCR พบว่าวิธีดังกล่าวมีความสามารถในการจำแนกยีนโดยค่าพารามิเตอร์ของการเกิดปฏิกิริยาอยู่ในเกณฑ์ที่ยอมรับได้ดังนี้ ค่า PCR efficiency 97 - 112 เปอร์เซ็นต์ (ค่าที่ยอมรับของวิธี Multiplex 80 - 120 เปอร์เซ็นต์) ค่า Linearity (R2) และค่า Slope เท่ากับ 0.99 และอยู่ในช่วง -3.38 ถึง -3.07 ตามลำดับ เทคนิคนี้มีขีดจำกัดการตรวจวิเคราะห์ (LOD) ที่ 0.1 เปอร์เซ็นต์ และเทคนิคการตรวจสอบ Mon810 NK603 และยีน HMG รวมกันในปฏิกิริยาเดียวกันแบบ Multiplex Real-time PCR สามารถใช้เป็นวิธีการตรวจวิเคราะห์ยีนของตัวอย่างข้าวโพดดัดแปรพันธุกรรมและผลิตภัณฑ์จากข้าวโพดได้

URL Reference :

(ดาวน์โหลด: 8 ครั้ง)

ปรับปรุงข้อมูลเมื่อวันที่ 24-03-2568

แจ้งไฟล์หาย