คลังผลงานวิจัย กรมวิชาการเกษตร

รายงานผลงานวิจัยและพัฒนา

การพัฒนาชุดตรวจสอบ Immuno Strip เพื่อตรวจสอบเชื้อแบคทีเรีย Xanthomonas campestris pv. campestris สาเหตุโรคเน่าดำของคะน้า

คำหลัก :

ผู้วิจัย : รุ่งนภา ทองเคร็ง

ผู้ร่วมวิจัย : ณัฎฐิมา โฆษิตเจริญกุล, บูรณี พั่ววงษ์แพทย์ และทิพวรรณ กันหาญาติ

หน่วยงาน : สำนักวิจัยพัฒนาการอารักขาพืช

ปี: 2562

ประเภทผลงาน: ผลงานวิจัยเรื่องเต็ม

จำนวนผู้อ่าน: 28 ครั้ง

บทคัดย่อ (Abstract)

          แบคทีเรีย Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc) สาเหตุโรคเน่าดำของคะน้า มีวัตถุประสงค์เพื่อนำเทคนิค Immuno Strip มาปรับใช้ในการตรวจสอบแบคทีเรียสาเหตุโรคใบเน่าดำของคะน้า ให้การตรวจสอบโรคทำได้อย่างมีประสิทธิภาพ ถูกต้อง แม่นยำ และสะดวกรวดเร็วมากขึ้นได้ ดำเนินการทดลองระหว่างเดือนตุลาคม 2559 - กันยายน 2562 การพัฒนาชุดตรวจสอบอิมมูโนสตริปใช้หลักการทางเซรุ่มวิทยา (serology) และ lateral flow technique บนแผ่นไนโตรเซลลูโลส
เมมเบรน (Nitrocellulose membrane ; NCM) โดยผลิตแอนติซีรัมที่จำเพาะต่อเชื้อ XCC ด้วย Membrane protein complex (MPC) ในการฉีดเข้าใต้ผิวหนังกระต่าย จำนวน 2 ครั้ง และเก็บเลือดกระต่ายในสัปดาห์ที่ 5 เป็นต้นไป จากการตรวจหาค่าไตเตอร์และทดสอบประสิทธิภาพของแอนติซีรัมที่ผลิตได้พบว่า แอนติซีรัมครั้งที่ 7 และครั้งที่ 8 มีค่าไตเตอร์สูงที่สุด คือ 1 : 128,000 และมีความจำเพาะเจาะจงกับเชื้อ) ในคะน้าเท่านั้น จึงเลือกใช้แอนติซีรัมครั้งที่ 7 และครั้งที่ 8 สำหรับเตรียม IgG บริสุทธิ์
และติดฉลากด้วยสารละลายอนุภาคทอง (Gold conjugated IgG) เพื่อระบายลงบนแผ่น CRP (conjugated release pad) ทำ control line ด้วย Goat anti rabbit (GAR) และ test line ด้วย IgG บนแผ่น nitrocellulose membrane ชนิด S&S-AE 99 สำหรับประกอบเป็นชุดตรวจสอบ จากการทดสอบประสิทธิภาพชุดตรวจสอบ Immuno-Strip ด้วยสารแขวนลอยแบคทีเรีย XCC ความเข้มข้น 108 หน่วยโคโลนี/มิลลิลิตร พบว่าสามารถตรวจสอบแบคทีเรียได้ โดยเส้น control line และ test line ปรากฏสีในเวลา 10 - 15 นาที จากการทดสอบประสิทธิภาพความไวของชุดตรวจสอบพบว่า สามารถตรวจแบคทีเรีย XCC ได้ในปริมาณต่ำสุดที่ 104 หน่วยโคโลนี/มิลลิลิตร และสามารถตรวจพบเชื้อได้ในน้ำคั้นพืชที่เจือจาง 1 : 2,000 ผลจากงานวิจัยนี้สามารถนำชุดตรวจสอบ Immuno-Strip ไปใช้ในการตรวจแบคทีเรีย XCC ในแปลงปลูกคะน้า เพื่อหาแนวทางการป้องกันกำจัดโรคได้อย่างมีประสิทธิภาพและทันต่อสถานการณ์ได้

URL Reference :

(ดาวน์โหลด: 15 ครั้ง)

ปรับปรุงข้อมูลเมื่อวันที่ 25-03-2568

แจ้งไฟล์หาย