คลังผลงานวิจัย กรมวิชาการเกษตร

รายงานผลงานวิจัยและพัฒนา

การโคลนยีน 5-aminolevulinate synthase (ALAS) จากจุลินทรีย์

คำหลัก : แบคทีเรียสังเคราะห์แสง เอนไซม์ 5-Aminolevulinate synthase กรด 5-อะมิโนลีวูลินิค

ผู้วิจัย : ภรณี สว่างศรี

ผู้ร่วมวิจัย : รุ่งนภา พิทักษ์ตันสกุล, สุภาวดี ง้อเหรียญ, ศุภลักษ์ สัตยสมิทสถิต

หน่วยงาน : สำนักวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีชีวภาพ ศูนย์วิจัยและพัฒนาเมล็ดพันธุ์พืชพิษณุโลก

ปี: 2561

ประเภทผลงาน: ผลงานวิจัยเรื่องเต็ม

จำนวนผู้อ่าน: 14 ครั้ง

บทคัดย่อ (Abstract)

          กรด 5-อะมิโนลีวูลินิค (5-aminolevulinic acid; ALA) เป็นสารชีวภาพสามารถนำมาใช้ประโยชน์ด้านการเกษตรเพื่อเป็นสารส่งเสริมการเจริญเติบโตของพืช แบคทีเรียสังเคราะห์แสงสามารถผลิต ALA ได้ในปริมาณที่สูงกว่าแบคทีเรียในกลุ่มอื่นๆ งานวิจัยนี้จึงได้คัดเลือกเชื้อแบคทีเรียสังเคราะห์แสงที่มีศักยภาพในการผลิตสาร ALA พบว่าเชื้อ Rhodobacter sphaeroides ไอโซเลท D34 มีศักยภาพในการผลิตสาร ALA ได้ดีจึงนำมาทำการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอในส่วนของยีนที่ควบคุมการผลิตเอนไซม์ ALA synthase ตรวจพบชิ้นยีนที่ได้มีขนาดประมาณ 1,224 คู่เบส เมื่อนำไปวิเคราะห์ลำดับนิวคลิโอไทด์แล้วเปรียบเทียบกับฐานข้อมูล NCBI พบว่า มีความคล้ายคลึงกับลำดับนิวคลีโอไทด์ ส่วนของยีน hem A ของเชื้อ Rhodobacter sphaeroides (Accession no. CP015210.1) ที่ identity 100 เปอร์เซ็นต์ เมื่อแปรรหัสเป็นลำดับของเปปไทด์ พบว่า มีความคล้ายคลึงกับอะมิโนแอซิดของยีน hemA (synthase) ของ Rhodobacter sphaeroides (Accession No. ACM01167.1) ที่ identity 99 เปอร์เซ็นต์ จากนั้นทำการเชื่อมต่อชิ้นยีน hem A เข้ากับ Protein Expression Vector (aLICator LIC Cloning and Expression system) แล้วถ่ายฝากพลาสมิดดีเอ็นเอสายผสมเข้าสู่เซลล์ E. coliสายพันธุ์ BL21 (DE3) และทำการทดสอบการแสดงออกในระดับโปรตีนของเอนไซม์ ALA synthase พบว่า รีคอมบิแนนท์เอนไซม์ALA synthase ที่ได้มีขนาดประมาณ 40 กิโลดาลตัน ซึ่งตรวจพบกิจกรรมของรีคอมบิแนนท์เอนไซม์ ALA synthase มีผลทำให้ recombinant E. coli สามารถผลิตสาร aminolevulinic acid (ALA) ได้ภายในระยะเวลา 12 ชั่วโมง ซึ่งเป็นแนวทางในการพัฒนากระบวนการผลิตสาร ALA เพื่อการนำไปใช้ประโยชน์ในด้านการเกษตรต่อไป

URL Reference :

(ดาวน์โหลด: 8 ครั้ง)

ปรับปรุงข้อมูลเมื่อวันที่ 10-06-2568

แจ้งไฟล์หาย