คลังผลงานวิจัย กรมวิชาการเกษตร

รายงานผลงานวิจัยและพัฒนา

การโคลนถ่ายฝากและศึกษายีน GmPR1 เพื่อความต้านทานโรคในพืชต้นแบบ Arabidopsis thaliana สำหรับเตรียมการถ่ายฝากสู่ถั่วเหลือง

คำหลัก :

ผู้วิจัย : จีราพร แก่นทรัพย์

ผู้ร่วมวิจัย : ขนิษฐา วงศ์วัฒนารัตน์, ประสาน สืบสุข, กุหลาบ คงทอง

หน่วยงาน : สำนักวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีชีวภาพ

ปี: 2560

ประเภทผลงาน: ผลงานวิจัยเรื่องเต็ม

จำนวนผู้อ่าน: 22 ครั้ง

บทคัดย่อ (Abstract)

          งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อโคลนและถ่ายฝากยีนต้านทานโรค GmPR1 ในพืชต้นแบบ Arabidopsis thaliana ทดสอบประสิทธิภาพก่อนการถ่ายฝากสู่ถั่วเหลือง โดยส่วน promoter หรือชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่ควบคุมการแสดงออกของยีนจะใช้ promoter ของยีน Glyma04g05080 ที่มีรายงานว่ามีการแสดงออกสูงในส่วนใบ ดอก และราก แต่มีการแสดงออกต่ำในเมล็ดและไม่แสดงออกในเมล็ดระยะใกล้เก็บเกี่ยว การถ่ายฝากชุดยีน GmPR1 ภายใต้การควบคุมของ promoter ดังกลำวจะทำให้ยีน GmPR1 แสดงออกในระดับที่สูงกว่าถั่วเหลืองปกติโดยแสดงออกเฉพาะส่วนใบ ดอกและราก ส่งผลให้สามารถผลิตถั่วเหลืองที่มีความต้านทานต่อโรคได้โดยไม่เกิดอันตรายต่อผู้บริโภคเมล็ดถั่วเหลือง ในงานวิจัยทำการสกัดดีเอ็นเอจากใบของถั่วเหลืองพันธุ์เชียงใหม่ 5 ซึ่งเป็นพันธุ์ต้านทานโรคราสนิม โรคราน้ำค้างและโรคใบจุดนูน ส่าหรับนำมาใช้เป็นดีเอ็นเอต้นแบบ (template DNA) ในการโคลนยีน GmPR1 และชิ้นส่วน promoter เนื่องจากยีน GmPR1 ประกอบด้วยส่วน Exon เพียงชนิดเดียวไม่มีส่วน Intron ในตัวยีน กล่าวคือ มีลำดับเบสเหมือนกับจีโนมดีเอ็นเอ และชิ้นส่วน promoter เป็นจีโนมดีเอ็นเอเช่นเดียวกัน
          ผลการโคลนยีน GmPR1 ได้พลาสมิดดีเอ็นเอสายผสมของยีน GmPR1 ภายใน cloning vector ชื่อพลาสมิด pBS 35S MCS GmPR1 โดยชิ้นส่วนยีน GmPR1 ที่ทำการโคลนมีขนาดถูกต้อง (525 bp) และมีลำดับดีเอ็นเอถูกต้องตรงตามฐานข้อมูล SoyBase และ National Center for Biotechnology Information (NCBI) โดยมีความเหมือน (Identities) กับ CDS ของยีน GmPR1 (Glyma13g251600) 100% สามารถนำไปต่อยอดในการสร้างชุดยีนอื่นๆ เพื่อผลิตพันธุ์พืชที่ต้านทานโรคสูงในอนาคต
          สำหรับผลการโคลนชิ้นส่วน promoter ได้พลาสมิดดีเอ็นเอสายผสมของ promoter ขนาด 1,000 bp ภายใน cloning vector ชื่อพลาสมิด pBS 35S MCS A1000 โดยชิ้นส่วน promoter ที่ทำการโคลนมีขนาดถูกต้อง (1,000 bp) และมีลำดับดีเอ็นเอถูกต้องตรงตามฐานข้อมูล Soybean Upstream Regulatory Element (SURE) โดยมีความเหมือน (Identities) กับลำดับดีเอ็นเอของ A1000 ที่รายงานในฐานข้อมูล SURE คิดเป็น 98.9% สามารถนำไปต่อยอดในการสร้างชุดยีนอื่นๆ โดยใช้เป็นส่วนที่ควบคุมการแสดงออกของยีน

URL Reference :

(ดาวน์โหลด: 9 ครั้ง)

ปรับปรุงข้อมูลเมื่อวันที่ 29-07-2568

แจ้งไฟล์หาย