คลังผลงานวิจัย กรมวิชาการเกษตร

รายงานผลงานวิจัยและพัฒนา

การโคลนยีนแลคเคสที่ควบคุมการย่อยสลายลิกนินทางชีวภาพโดยใช้เทคโนโลยีรีคอมบิแนนท์ดีเอ็นเอ

คำหลัก : แลคเคส การโคลนยีน เอนไซม์ย่อยสลายลิกนิน รีคอมบิแนนท์ดีเอ็นเอ

ผู้วิจัย : ภรณี สว่างศรี

ผู้ร่วมวิจัย : อัจฉราพรรณ ใจเจริญ, สุภาวดี ง้อเหรียญ, รุ่งนภา พิทักษ์ตันสกุล, บุญเรือนรัตน์รัตน์ เรืองวิเศษ

หน่วยงาน : สำนักวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีชีวภาพ

ปี: 2560

ประเภทผลงาน: ผลงานวิจัยเรื่องเต็ม

จำนวนผู้อ่าน: 23 ครั้ง

บทคัดย่อ (Abstract)

          แลคเคส เป็นเอนไซม์ที่ย่อยสลายลิกนินสามารถผลิตโดยเชื้อราขาว Ganoderma การทดสอบการผลิตเอนไซม์แลคเคสในอาหารเหลวที่มีลิกนินเป็นองค์ประกอบ 1 เปอร์เซ็นต์ (น้ำหนักโดยปริมาตร) เพื่อเป็นแหล่งคาร์บอนและเป็นตัวเหนี่ยวนำสำหรับการผลิตเอนไซม์แลคเคส งานวิจัยนี้ได้คัดเลือกเชื้อ Ganoderma sp. ไอโซเลท G1-1 ซึ่งมีศักยภาพในการผลิตเอนไซม์แลคเคสได้ดีที่สุด เมื่อนำมาจำแนกชนิดโดยการวิเคราะห์ลำดับเบสในส่วนของ internal transcribed spacer (ITS) และเปรียบเทียบลำดับเบสกับฐานข้อมูลใน GanBank พบว่ามีความคล้ายคลึงกับเชื้อ Ganoderma lucidum ที่ความเหมือน 100 เปอร์เซ็นต์ นอกจากนี้เมื่อโคลนยีนแลคเคสจากเชื้อ Ganoderma sp. ไอโซเลท G1-1 โดยการทำปฏิกิริยา RT-PCR พบว่าชิ้นยีนแลคเคสที่ได้มีขนาด 1,563 คู่เบส ซึ่งมีลำดับของเพปไทด์เท่ากับ 520 อะมิโนแอซิด การศึกษาการแสดงออกของยีนโดยการเชื่อมต่อชิ้นยีนแลคเคสเข้ากับ expression vector pLATE52 และถ่ายฝากเข้าสู่ E. coli BL21 (DE3) ทดสอบการผลิตรีคอมบิแนนท์โปรตีน โดยการชักนำด้วยสาร IPTG และวิเคราะห์รีคอมบิแนนท์เอนไซม์แลคเคสด้วยวิธี SDS-PAGE

URL Reference :

(ดาวน์โหลด: 11 ครั้ง)

ปรับปรุงข้อมูลเมื่อวันที่ 29-07-2568

แจ้งไฟล์หาย