คลังผลงานวิจัย กรมวิชาการเกษตร

รายงานผลงานวิจัยและพัฒนา

การเก็บรวบรวม อนุรักษ์ และจำแนกชนิด Bacillus thuringiensis

คำหลัก :

ผู้วิจัย : บุญเรือนรัตน์ เรืองวิเศษ

ผู้ร่วมวิจัย : ภรณี สว่างศรี, นุชนารถ ตั้งจิตสมคิด

หน่วยงาน : สำนักวิจัยพัฒนาเทคโนโลยีชีวภาพ

ปี: 2560

ประเภทผลงาน: ผลงานวิจัยเรื่องเต็ม

จำนวนผู้อ่าน: 27 ครั้ง

บทคัดย่อ (Abstract)

          ในการอนุรักษ์จุลินทรีย์ที่มีประโยชน์ทางการเกษตร ได้ทำการเก็บรวบรวม อนุรักษ์ และจำแนกชนิดของบีที (B.thuringiensis) จากดินในภูมิภาคต่างๆ ทั่วประเทศ จากนั้นนำมาคัดแยกเชื้อด้วยวิธี Spread plate โดยคัดเลือกโคโลนีที่ขึ้นบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อมีลักษณะขนาดใหญ่ ผิวหน้าโคโลนีด้านไม่เป็นมันวาวและมีขอบไม่เรียบ ซึ่งเป็นลักษณะของเชื้อ Bacillus thuringiensis จากตัวอย่างดินทั้งหมด 288 ตัวอย่าง เมื่อนำมาศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเชื้อโดยการย้อมแกรมแล้ว เลือกโคโลนีที่ติดสีแกมบวก คือ Crystal Violet โดยมีลักษณะรูปร่างเป็นท่อนตรง มีผลึกโปรตีน และสปอร์อยู่ภายในเซลล์การทดสอบเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอในหลอดทดลองด้วยเทคนิคพีซีอาร์ด้วยไพเมอร์ btF-R และตรวจสอบผลด้วยการรันเจลด้วยเครื่อง Electro phoresis พบว่าได้ผลของพีซีอาร์ขนาดแถบแบนเท่ากับ 1500 pb นำผลพีซีอาร์ไปตรวจสอบลำดับนิวคลีโอไทด์ และนำผลที่ได้มาเทียบกับฐานข้อมูลลำดับนิวคลีโอไทด์ด้วยโปรแกรม NCBI พบว่าได้เชื้อ Bacillus thuringiensis จำนวน 57 ไอโซเลท จากการนำเชื้อ B.thuringiensis ตรวจสอบขนาดโปรตีน ด้วยเทคนิค SDS-PAGE โดยใช้เครื่อง XCell SureLockTM (NOVEX Mini-Cell) และใช้Protein marker 5 µl. เป็น standard marker ในการทดลอง ซึ่งประกอบด้วยแถบแบนที่มีน้ำหนักโมเลกุล 11, 17, 25, 35, 48, 63, 75, 100, 135 และ 180 กิโลดาลตัน พบว่าแบนที่ได้ส่วนใหญ่จะผลิตโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลในช่วง 25 - 48 กิโลดาลตัน

URL Reference :

(ดาวน์โหลด: 10 ครั้ง)

ปรับปรุงข้อมูลเมื่อวันที่ 30-07-2568

แจ้งไฟล์หาย