คลังผลงานวิจัย กรมวิชาการเกษตร

รายงานผลงานวิจัยและพัฒนา

การพัฒนาเทคนิคการตรวจวินิจฉัยเชื้อ Acidovorax avenae subsp. citrulli ด้วยวิธี PCR-ELISA

คำหลัก : เชื้อ Acidovorax avenae subsp. citrulli

ผู้วิจัย : วันเพ็ญ ศรีชาติ

ผู้ร่วมวิจัย : ณัฎฐิมา โฆษิตเจริญกุล, ปริเชษฐ์ ตั้งกาญจนภาสน์ และกาญจนา วาระวิชะนี

หน่วยงาน : สำนักวิจัยพัฒนาการอารักขาพืช

ปี: 2556

ประเภทผลงาน: รายงานความก้าวหน้า

จำนวนผู้อ่าน: 7 ครั้ง

บทคัดย่อ (Abstract)

          ในการตรวจสอบเชื้อ A.avenae subsp. citrulli ได้รับเชื้อจำนวน 2 ไอโซเลท ที่แยกได้จากผลแตงโม โดยไพรเมอร์ที่ใช้ในการตรวจสอบมี จำนวน 2 คู่ ได้แก่ WFB1 (F) 5’-GAC CAG CCA CAC TGG GAC-3’/WEB2 ® 5’-CTG CCG TAC TCC AGC GAT-3’ และ WFBA (F) 5’-CGA CCA GCC ACA CTG GGA -3’/ WFBA ® 5’- CCT CTG CCG TAC TCC AGC G-3’ ส่วน Probe จำนวน 1 เส้น คือ 5'-BIO-CCG TAA GAA TAA GCA CCG GC-3' และจากการตรวจสอบประสิทธิภาพของลำดับเบสของไพรเมอร์ (primer) ไพรเมอร์ทั้ง 2 คู่ สามารถสังเคราะห์แถบดีเอ็นเอของเชื้อ A.avenae subsp. citrulli ที่ความเข้มข้น 107 cfu/ml ได้ชัดเจน โดยเฉพาะ ไพรเมอร์คู่ WFBA (F)/WFBA ® สามารถตรวจพบแถบดีเอ็นเอได้ชัดเจนกว่าไพรเมอร์คู่ WFB1 (F) / WEB2 ® ในส่วนของการติดฉลากด้วยสาร digoxigenin (DIG) กับไพรเมอร์และเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอของเชื้อ A. avenae subsp. citrulli และชุดควบคุมด้วยเทคนิคพีซีอาร์พบว่า ได้ PCR product ของสารแขวนลอยเชื้อแบคทีเรีย จำนวน 9 ตัวอย่าง ที่ความเข้มข้นต่างๆ คือ 1, 10, 10(2), 10(3), 10(4), 10(5), 10(6), 10(7) และ 10(8) cfu/ml และชุดควบคุม จำนวน 2 ตัวอย่าง คือ positive control และ negative control

URL Reference :

(ดาวน์โหลด: 5 ครั้ง)

ปรับปรุงข้อมูลเมื่อวันที่ 16-08-2563

แจ้งไฟล์หาย